猴源细胞STR鉴定怎么做？

发布时间：2025-05-27 16:50:51 热度：39

猴源细胞STR（短串联重复序列）鉴定是一种用于验证猴源细胞系身份和检测交叉污染的分子生物学方法。该方法通过分析猴源细胞基因组中特定的STR位点，生成独特的“基因指纹”，以确保实验用细胞的准确性和可靠性。以下是猴源细胞STR鉴定的具体操作流程、注意事项及相关服务信息：

一、猴源细胞STR鉴定的操作流程

样本准备

细胞样本要求：需提供细胞悬液或细胞沉淀（细胞数量≥10⁶个），或提取的DNA（浓度≥50 ng/μL，体积≥20 μL）。

DNA提取：可采用酚/氯仿法或商业化DNA提取试剂盒进行基因组DNA提取48。

STR位点扩增（PCR）

STR位点选择：猴源细胞通常检测8-10个特异性STR位点（如Vero细胞鉴定使用8个位点）。

PCR扩增：使用荧光标记引物对目标STR位点进行扩增，以提高检测灵敏度8。

毛细管电泳分离

将PCR产物进行毛细管电泳，通过荧光信号检测各STR位点的等位基因片段长度。

数据分析与比对

分析电泳图谱，确定每个STR位点的基因型。

将结果与已知猴源细胞STR数据库比对，判断细胞身份及是否存在交叉污染（如人源或鼠源污染）。

结果报告

提供STR分型报告，包括细胞身份确认、污染检测结果及数据比对分析。

二、猴源细胞STR鉴定的应用场景

疫苗生产：如Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）的年检，确保疫苗生产用细胞无污染。

科研实验：在发表文章或申请课题前进行细胞鉴定，避免因细胞污染导致数据不可靠。

细胞冻存与复苏：对长期冻存的细胞或新引入的细胞进行STR鉴定，确保细胞系真实性。

三、注意事项

样本运输：细胞样本需冷链运输（干冰或冰袋），避免DNA降解。

实验质量控制：确保PCR扩增效率，避免非特异性扩增。

                         使用阳性/阴性对照，提高结果可靠性。

污染检测：猴源细胞STR鉴定需特别关注是否被人源或鼠源细胞污染52。

四、相关服务提供商

华科鉴联基因：支持猴源细胞STR分型检测，并提供中英文报告，适用于SCI投稿。

五、总结

猴源细胞STR鉴定是确保实验数据可靠性的重要手段，尤其适用于疫苗生产、科研及细胞库管理。实验流程包括DNA提取、PCR扩增、电泳分离及数据分析，关键点在于选择合适的STR位点并严格控制实验质量。如需专业服务，可联系阅微基因、华科鉴联基因等机构进行检测。